Conoscenza generale di vari approci sperimentali basati su alcune metodologie di laboratorio biomolecolare.

Conoscenza dello scopo, del dettaglio metodologico  e della  relativa applicazione delle metodologie scientifiche affronatate nel corso. 

Capacità di analisi delle metodologie biomolecolari affrontate, presenti in lavori scientifici.

Programma del corso:

Parte di Teoria:

Colture cellulari: Allestimento, ed espansione di colture cellulari eucariotiche. Conta cellulare con Trypan blue.

Isolamento degli acidi nucleici:Estrazione DNA. Estrazione RNA. Estrazione mRNA.

Estrazione PBMCs.

Metodi impiegati per la determinazione della concentrazione e purezza degli acidi nucleici. Elettroforesi in gel di agarosio. QBit. Spettrofotometro

Metodiche di biologia molecolare: PCR, Real Time PCR, RT-PCR. Digestione con DNasi

Studio di Proteine:  Estrazione di proteine e loro quantificazione
ELISA assay
Tecniche di immunoistochimica
Western blot

Parte Pratica:

Esercitazioni svolte in laboratorio:
1°a Estrazione del DNA. 1°b. Valutazione della concentrazione e purezza del DNA estratto (spettofotometro)
2° Elettroforesi in gel di agarosio
3° Purificazione di DNA da gel di agarosio
4° Estrazione dell'RNA. 4b. Quantificazione Spettrofotometrica dell'RNA
5° Retrotrascrizione
6° Rt-PCR
7° PCR
8° Estrazione di Proteine cellulari

9° Determinazione della concentrazione proteica (BCA)

10° Immunofluorescenza

11° Conta cellule

Conoscenza delle varie tecniche di metodologie biomolecolari inerenti l'analisi degli acidi nucleici e saggi proteici. Vari metodi a confronto, e relativi impieghi.

Esercitazioni pratiche di laboratorio di metodologie biomolecolari.

Modalità didattiche

Corso che prevede una parte teorica ed una parte pratica di laboratorio, inerenti tecniche di metodologie biomolecolare.

Vedere relativo programma dettagliato del corso.

Obblighi

Raccomandata la frequentazione del laboratorio .

Testi di studio

1. Testo Consigliato:

Biochimica e biologia molecolare

K . Wilson e J.Walker,

Raffaello Cortina Editore

2. Testo Consigliato

Analisi dei geni e genomi

Richard J. Reece,

EdiSES

Modalità di
accertamento

La valutazione si basa su una prova orale inerente tutto il programma svolto e la valutazione di due tesine  sperimentali brevi inerenti le tecniche trattate/ eseguite durante il corso e la presentazione di un lavoro scientifico che riporti almeno una tecnica affronatata nel corso, da relare durante la prova orale.

Le 2 tesine di laboratorio  e l'articolo scientifico, dovranno essere inviati in formato elettronico almeno 5 giorni prima della prova orale, al docente.

Disabilità e DSA

Le studentesse e gli studenti che hanno registrato la certificazione di disabilità o la certificazione di DSA presso l'Ufficio Inclusione e diritto allo studio, possono chiedere di utilizzare le mappe concettuali (per parole chiave) durante la prova di esame.

A tal fine, è necessario inviare le mappe, due settimane prima dell’appello di esame, alla o al docente del corso, che ne verificherà la coerenza con le indicazioni delle linee guida di ateneo e potrà chiederne la modifica.

Modalità didattiche

Idem studenti frequentanti

Testi di studio

Idem studenti frequentanti

Modalità di
accertamento

Idem studenti frequentanti

Disabilità e DSA

Le studentesse e gli studenti che hanno registrato la certificazione di disabilità o la certificazione di DSA presso l'Ufficio Inclusione e diritto allo studio, possono chiedere di utilizzare le mappe concettuali (per parole chiave) durante la prova di esame.

A tal fine, è necessario inviare le mappe, due settimane prima dell’appello di esame, alla o al docente del corso, che ne verificherà la coerenza con le indicazioni delle linee guida di ateneo e potrà chiederne la modifica.