Università degli Studi di Urbino Carlo Bo / Portale Web di Ateneo

BIOTECNOLOGIE DELLE FERMENTAZIONI E DOWNSTREAM PROCESSING (MODULO: DOWNSTREAM PROCESSING)

A.A. CFU
2010/2011 6
Docente Email Ricevimento studenti
Paolino Ninfali

Assegnato al Corso di Studio

Biotecnologie molecolari (LM-8)
Giorno Orario Aula

Obiettivi Formativi

 Il corso è finalizzato allo studio dei metodi di purificazione di enzimi o proteine non enzimatiche a partire dal terreno di coltura del bioreattore o dai microorganismi utilizzati per la produzione della proteina ricombinante. Particolare attenzione verrà data alla caratterizzazione del prodotto finito nonchè al suo stoccaggio e conservazione. La parte di laboratorio consentirà allo studente di purificare una proteina con due diversi tipi di cromatografia ed effettuare i relativi calcoli sul bilancio di massa e sulla qualità del prodotto ottenuto.

Programma

•Caratteristiche chimico-fisiche delle proteine. Termostabilità, peso molecolare, punto isoelettrico, caratteristiche idrofobiche, densità, proprietà di legame. •Recupero del prodotto. Prodotto extracellulare, prodotto intracellulare: lisi della cellula con sistemi meccanici, chimici, fisici, enzimatici. •Separazione. Sedimentazione, centrifugazione differenziale o isopicnica, estrazione con solvente: sistemi liquido-liquido, solido-liquido, sistemi in batch, sistemi continui in controcorrente; dialisi, filtrazione su membrane. •Concentrazione. Evaporazione, ultrafiltrazione, filtrazione tangenziale (Quixstand system), adsorbimento, osmosi inversa, precipitazione di proteine con sali, solventi organici, polietilenglicole, cambio di pH o temperatura. •Separazione cromatografia. Cromatografia a scambio ionico, ad interazioni idrofobiche, di adsorbimento, a setaccio molecolare, matrici dye ligand pseudospecifiche, di affinità, di immunoaffinità, vantaggi e svantaggi delle varie fasi fisse. Fattore di risoluzione della colonna. Fase mobile: criteri per la sua composizione, eluizione stepwise o con gradiente.   •Monitoraggio delle lavorazioni a valle: valutazione del profilo di eluizione con misure di assorbanza UV-VIS, attività enzimatica, conducibilità. Valutazione della purezza della proteina: isoelettrofocalizzazione, elettroforesi mono e bidimensionale, western blotting, analisi HPLC, elettroforesi capillare. •Bilanci di massa. La tabella di purificazione: come si costruisce e quali sono i parametri fondamentali. Analisi dei contaminanti: le enterotossine e i residui dei solventi, formulazione del prodotto, essiccazione, liofilizzazione; sterilizzazione, controllo della stabilità dei prodotti. •Integrazione del processo. Integrazione fra fermentazione e separazione del prodotto; integrazione fra chiarificazione, concentrazione e  purificazione ( adsorbimento su letto espanso) •Implementazione su macroscala . Problemi nel passaggio dallo studio pilota al  protocollo industriale: rapporto fra volumi di eluente e fase fissa; rapporto fra quantità di campione e resina, mantenimento di un flusso lineare. •Applicazioni dei processi di a valle. Produzione di eritropoietina umana ricombinante (discussione del lavoro teorico);  Purificazione di bioflavonoidi da vegetali: C02 supercritica, e cromatografia in controcorrente.

Eventuali Propedeuticità

Nessuna

Attività di Supporto

Laboratorio


Modalità Didattiche, Obblighi, Testi di Studio e Modalità di Accertamento

Modalità didattiche

 lezioni frontali e laboratorio

Obblighi
Testi di studio

 BIOTECNOLOGIE DI BASE: a cura di Colin Ratledge, Bjørn Kristiansen
Traduzione di Mara Oliveri, revisione di Giorgio Corte 2004, 408 pagine; 39,00 euro, isbn 88-08-07775-6

Modalità di
accertamento
Disabilità e DSA

Le studentesse e gli studenti che hanno registrato la certificazione di disabilità o la certificazione di DSA presso l'Ufficio Inclusione e diritto allo studio, possono chiedere di utilizzare le mappe concettuali (per parole chiave) durante la prova di esame.

A tal fine, è necessario inviare le mappe, due settimane prima dell’appello di esame, alla o al docente del corso, che ne verificherà la coerenza con le indicazioni delle linee guida di ateneo e potrà chiederne la modifica.

Informazioni Aggiuntive per Studenti Non Frequentanti

Testi di studio

BIOTECNOLOGIE DI BASE: a cura di Colin Ratledge, Bjørn Kristiansen
Traduzione di Mara Oliveri, revisione di Giorgio Corte 2004, 408 pagine; 39,00 euro, isbn 88-08-07775-6

« torna indietro Ultimo aggiornamento: 04/02/2011

Il tuo feedback è importante

Raccontaci la tua esperienza e aiutaci a migliorare questa pagina.

15 22

Se sei vittima di violenza o stalking chiama il 1522, scarica l'app o chatta su www.1522.eu

Il numero, gratuito è attivo 24 h su 24, accoglie con operatrici specializzate le richieste di aiuto e sostegno delle vittime di violenza e stalking.

In contatto

Comunicati Stampa
Rassegna Stampa

Live

Guarda in diretta
Accedi al canale

PRIVACY

Responsabile della Protezione dei Dati (RPD)
Data Protection Officer (DPO)
Informative

Salute e sicurezza

Sicurezza in Ateneo
In caso di emergenza
DAE - Defibrillatori

Portale

Sitemap
Privacy policy
Cookie policy
Social media policy
Dati di Monitoraggio
Il tuo feedback
Note Legali
Webmaster d'Ateneo
Dichiarazione di Accessibilità

Hai bisogno di aiuto?

Consulta le FAQ
Persone con DSA
Persone con Disabilità

Connect

Wireless e Autenticazione
Posta elettronica del Personale
Posta elettronica degli Studenti
Segreteria Studenti - ESSE3

Posta elettronica certificata

amministrazione@uniurb.legalmail.it

Social

Università degli Studi di Urbino Carlo Bo
Via Aurelio Saffi, 2 – 61029 Urbino PU – IT
Partita IVA 00448830414 – Codice Fiscale 82002850418
2024 © Tutti i diritti sono riservati

Top